第14节　精液检验

考纲要求

①精液的组成及检查的主要目的；②精液标本的采集及注意事项；③精液理学、化学、免疫学、微生物学及显微镜的检验；④精子功能的检验；⑤计算机辅助精子分析系统；⑥精液检验的质量控制。

复习要点

一、精液检查的概述

1.精液的组成★

精液是由精子和精浆组成，其中5%为精子，95%为精浆。精子产生于睾丸，在附睾内发育成熟。精浆是男性附性腺分泌的混合液，60%来自精囊，含有较多的果糖，可为精子的活动提供能量；30%来自前列腺，其中所含的蛋白水解酶及纤维蛋白水解酶有助于精液的液化和精子穿过宫颈黏液栓及卵子的透明带，有利于受孕；还有5%～10%的精浆来自附睾、输精管壶腹、尿道球腺、尿道旁腺等。

2.精液检查的主要目的★★

精液检查目的：①评估男性生育功能，提供不育症诊断和疗效观察的依据；②辅助诊断男性生殖系统疾病；③输精管结扎术疗效；④体外受精；⑤计划生育科研；⑥婚前检查；⑦法医学鉴定。

二、精液标本的采集

1.标本采集★★

采集前禁欲3～5d，采集时先排净尿液，将一次射出的全部精液排入洁净、干燥的容器内（不能用乳胶避孕套）。微生物培养标本必须无菌操作。

2.标本运送★★

保温（20～40℃）立即送检（<1h）。

3.采集次数★★

每隔1～2周检查1次，连续检查2～3次。

三、精液的理学检验

1.精液外观和气味★★

正常人精液刚射出呈微浑浊灰白色，有腥味，液化后呈半透明乳白色，久未射精者呈浅黄色。红色血性精液见于前列腺炎、精囊腺炎症、结核、肿瘤、结石；黄色脓性精液见于前列腺炎或精囊炎。

2.精液量★★

用10mL刻度吸管测定精液。正常男性一次排精量为2～6mL，平均3.5mL。精液量<1mL或>8mL为异常，不利于生育。

3.精液液化时间★★

（1）概念　精液液化时间是指精液由胶冻状转变为自由流动状态所需的时间。正常精液在排出后5～10min开始液化，30min完全液化，若60min仍未液化为异常，提示前列腺炎。液化过程受精浆中的枸橼酸的影响，枸橼酸通过与钙离子结合而调节精浆钙离子的浓度，影响射精后精液凝固与液化过程。

（2）检测方法　常用吸管法，即刚排出的精液较为稠厚，一般难以吸入吸管，置37℃水浴中，每5min检查1次，直至液化，记录精液由胶冻状至流动状所需时间。

4.精液黏稠度★

黏稠性主要与凝固酶有关。黏稠度增加的精液常伴有不液化，影响精子活力，致使精子穿透障碍；黏稠度下降，见于先天性无精囊腺、精子浓度太低、无精子症。

检测方法包括：①直接玻棒法，将玻棒插入精液标本，观察提棒时黏丝长度，正常精液黏丝长度不超过2cm，黏稠度增加时可形成长于2cm的长丝。②黏度计法，测定0.5mL精液通过黏度计所需的时间。

5.精液酸碱度★

用精密pH试带或酸度计在射精后1h内测定。正常精液pH 7.2～7.8；pH<7.0且伴少精症，常反映输精管道阻塞、先天生精囊缺如或附睾病变；pH>7.8常见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎。

四、精液的化学检验

1.精浆果糖测定★

（1）测定方法　间苯二酚比色法、吲哚显色法。

（2）临床意义　果糖减低见于先天性精囊腺缺如、精囊炎、精囊阻塞、射精管阻塞。

2.精浆α-葡萄糖苷酶测定★

（1）测定方法　比色法测定其精浆中的活性，葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量。

（2）临床意义　阻塞性无精子症，α-葡萄糖苷酶活性下降，具有肯定性诊断价值。

3.精浆乳酸脱氢酶同工酶-X（LD-X）测定★

（1）测定方法　聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联染色、光度计扫描法。

（2）参考值　相对活性≥42.6%。

（3）临床意义　精子发生缺陷、少精或无精、精液理学检查正常的不育者，LD-X活性减低，精液常规检查正常的不育患者，也可因LD-X活性下降而引起不育。

4.精浆酸性磷酸酶（ACP）测定★

（1）测定方法　速率法、β-硝基酚法。

（2）临床意义　前列腺癌和前列腺增生症时，ACP活性增高；前列腺炎时ACP活性减低。

五、精液显微镜检验

1.涂片检验方法★★

取1滴混匀的精液置于载玻片上，在低倍镜下粗略观察有无精子，是活动精子还是不活动精子。若遇无精子症，应将标本离心后取沉淀物重复检查。

2.涂片检测指标★★

（1）精子活动率　取液化均匀的精液1滴置玻片上，加盖玻片放置片刻，高倍镜下观察计数100个精子中活动精子所占精子总数的比例。正常人精液在排精30～60min，精子活动率>70%。

（2）精子存活率　取液化均匀的精液1滴置载玻片上，加染色液（伊红Y、台盼蓝等）混匀，放置片刻，高倍镜下观察计数200个精子中不着色的精子所占精子总数的比例。正常精液精子存活率≥58%。

（3）精子活动力　取液化均匀的精液1滴置玻片上，加盖玻片放置片刻，高倍镜下观察计数100个精子中各级活动力百分率。结果判断如下。

①a级 快速前向运动（Ⅲ级，直线运动）。

②b级 缓慢或呆滞前向运动（Ⅱ级，运动缓慢）。

③c级 非前向运动（Ⅰ级，原地运动）。

④d级 不动（0级，不活动）。

（4）参考值　射精后60min内，a级精子≥25%；或a级和b级精子总和≥50%。

（5）临床意义　精子活动率减低，见于精索静脉曲张、使用某些药物（雌激素、抗疟药）、泌尿生殖系感染（前列腺炎等）。

3.精子计数★★

单位体积中的精子数即精子浓度。精子计数乘以1次射精量，即1次射精的精子总数。

（1）粗略估计法　取液化均匀的精液1滴置玻片上，盖上盖玻片放置片刻，高倍镜下观察5个视野，取每个视野的精子平均数×109即为精子数。该法操作简便，但只能粗略估计。

（2）精确计数法

①血细胞计数板计数 只能用于精子数量的观察，不能同时进行精子活动率、活动度等的检查。

②Makler精子计数板 精液不需要稀释，一次加样可同时计数精子密度，分析精子的活动力和活动率。

③计算机辅助精液分析（CASA） 利用图像和计算机视屏技术进行精子计数，简单、快速，但易受精液中细胞成分和非精子颗粒物质的影响。

（3）参考值　精子总数≥40×106，精子浓度（50～100）×109/L。

（4）临床意义　精子数量减低可见于精索静脉曲张、输精管或精囊缺如、先天性或后天性睾丸疾病（如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等）、重金属损害（如铅、镉中毒或放射性损害）、某些药物（如抗癌药、棉酚）及50岁以上男性。

4.精子形态检查★★

（1）检测方法

①涂片染色检查 将精液涂成薄片、干燥、固定后进行HE染色，或直接进行瑞氏-古姆萨染色，油镜下计数200个精子，报告正常或异常精子的百分率。本法无须特殊设备，临床上多釆用此法。

②相差显微镜检查 用相差显微镜（600×）直接对新鲜精液湿片观察。本法操作较简单，但需特殊设备，临床上较少用。

（2）精子形态

①正常形态 蝌蚪状，由头、体（颈、中段）、尾构成。头部正面呈卵圆形，侧面呈扁平梨形；体部轮廓直而规则；尾部细长。

②异常形态 头部呈双头、大头、小头、锥形头、梨形头、无定形头；体部呈肿胀、不规则；尾部呈短尾、多尾、发夹状尾、断尾。

（3）临床意义　正常精液中异常精子<20%。>40%会影响到精液质量，>50%会导致不育。感染、外伤、酒精中毒、高温、放射线、药物和精索静脉曲张均可使畸形精子数量增加。

5.精液的其他细胞★

（1）未成熟生殖细胞　各阶段发育不完全的生精细胞，包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及发育不全的精子细胞。正常人未成熟生精细胞<1%，成熟精细胞≥99%；精曲小管（曲细精管）受损（如药物或其他因素）时，可出现较多的未成熟生精细胞。

（2）红细胞、白细胞、上皮细胞　正常偶见红细胞、上皮细胞，白细胞<5/HP。红细胞、白细胞数增高见于生殖道炎症、结核、恶性肿瘤。上皮细胞增多见于前列腺增生症。

（3）癌细胞　精液中查见癌细胞对生殖系恶性肿瘤的诊断可提供重要依据。

六、精液的免疫学检验

1.抗精子抗体（AsAb）★

抗精子抗体（AsAb）常用的检查方法包括混合抗免疫球蛋白试验（MAR）、精子凝集试验（SAT）和免疫珠试验（IBT）。≥50%的精子与颗粒黏附，可能为免疫性不育，10%～50%的精子与颗粒黏附，可疑为免疫性不育。SAT阳性提示血清、生殖道分泌物中存在AsAb。IBT黏附率≥20%为阳性，≥50%有临床意义。

2.精浆免疫抑制物质★

人类精液中含有30余种抗原，因其含有免疫抑制物质，故当精液进入女性生殖道后通常不会引起免疫应答。免疫抑制物质降低，可见于不育症、习惯性流产、配偶对丈夫精液过敏等。

3.精液免疫球蛋白★

AsAb阳性者，IgM增高；生殖道炎症时，分泌型IgA增高。

七、精液的微生物学检验★

精液中常见的微生物有金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、淋球菌、支原体、衣原体等。在常规消毒的条件下，以手淫法采集精液于无菌容器内，常规涂片进行革兰染色，亦可做细菌培养。

八、精子功能检验（精子低渗肿胀实验，HOS）

1.检验原理★

观察精子在低渗溶液中尾部形态变化，以检测精子膜的完整性。将精子置入低渗溶液中，用相差显微镜观察100～200个精子，计算肿胀率。

2.结果判断★

a型：未出现肿胀。b型：尾尖肿胀。c型：尾尖弯曲肿胀。d型：尾尖肿胀伴弯曲肿胀。e型：尾弯曲肿胀。f型：尾粗短肿胀。g型：全尾部肿胀。

3.参考值★

g型精子肿胀率>50%。

4.临床意义★

作为体外精子膜功能和完整性评估指标。不育症患者肿胀率明显减低。

九、计算机辅助精子分析（CASA）★

利用计算机视频技术，通过一台与显微镜相连的录像机，确定、跟踪单个精子的活动，计算精子的运动学参数。CASA既可定量分析精子总数、活动率、活动力，又可分析精子运动速度和运动轨迹特征，在分析精子运动能力方面显示了其独特的优越性。

十、精液检验的质量控制★

注意标本的正确收集，收到标本后应立即放入37℃水浴中保温。应一人一管，避免吸管、试管等的交叉污染。尽可能保证在同一实验室或同一地区，检查的项目、方法和结果判断一致。试验操作者应做好安全防护，防止被精液污染造成意外伤害。用过的精液标本应用火烧毁，也可将其浸入0.1%过氧乙酸中12h或5%甲酚皂溶液中24h后倒掉。

考题回顾与同步练习

【例1】正常精液的颜色一般为

A.无色　B.灰白色　C.黄色　D.淡红色　E.棕色

【例2】有生殖能力男性的活精子率一般大于

A.55%　B.60%　C.65%　D.70%　E.75%

【例3】畸形精子症指正常形态的精子百分数小于

A.30%　B.35%　C.40%　D.45%　E.50%

【例4】精液复查，应在第1次标本采集后，间隔

A.2d以上　B.4d以上　C.5d以上　D.6d以上　E.7d以上

【例5】对生育影响较为重要的异常精子形态为

A.双头　B.双尾　C.无尾　D.体部肿胀　E.尾弯曲

【例6】精子在原地打转，其活动度应为

A.a级　B.b级　C.c级　D.d级　E.0级

【例7】精液中为精子提供活动能力的物质是

A.精浆蛋白　B.葡萄糖　C.果糖　D.乳糖　E.维生素C

【例8】异常的精子形态不包括

A.头部异常　B.体部异常　C.尾部异常　D.染色体异常　E.联合缺陷体

【例9】精浆中的枸橼酸与精液的哪项内容密切相关

A.精子的活力　B.精液的颜色　C.精子成活率　D.精子的畸形　E.精液的凝固与液化过程

【例10】泌尿系结石或肿瘤患者的精液呈

A.黄色或脓性　B.红色或血性　C.淡黄色　D.半透明状　E.灰白色或乳白色

参考答案

1.B　2.E　3.A　4.E　5.A　6.C　7.C　8.D　9.E　10.B