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第十节 血清α2-巨球蛋白测定
α 2-巨球蛋白(α 2-macroglobulin,α 2-MG)是由4个相同亚基组成的,分子量约725kD的血浆中最大糖蛋白,约占血浆总蛋白的8%~10%,由肝细胞、单核-巨噬细胞等合成,半衰期约5天。α 2-MG是对肽链内切酶(纤维蛋白溶酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及组织蛋白酶D等)具有特异抑制作用的蛋白酶抑制物,也是血浆锌、激素和酶转运载体,还可刺激淋巴细胞和粒细胞发育。血清α 2-MG可用各种定量免疫学方法测定,下面以应用较多的免疫比浊法为例介绍。
【原理】
抗人α 2-MG多或单克隆抗体与样本血清中α 2-MG通过抗原-抗体反应特异性结合,形成免疫复合物微粒,导致浊度增加。在一定条件下,浊度的增加与免疫复合物微粒数即α 2-MG数相关,得以定量样本中α 2-MG浓度。浊度检测包括散射浊度法和透射浊度法2类(参阅本章第二节血清白蛋白测定中的免疫比浊法)。下面以目前α 2-MG测定较多采用的散射浊度法为例介绍。
【试剂】
选用有正式批文、量值可溯源至人血清蛋白参考物CRM 470的质量可靠产品。下面以α 2-MG散射浊度法某试剂盒为例。该试剂盒由含标定滴度的羊抗人多克隆α 2-MG抗体和防腐剂的抗血清、含聚乙二醇和防腐剂的缓冲液及稀释液组成。
【操作】
不同实验室具体反应条件会因所用仪器和试剂而异,在保证方法可靠的前提下,应按仪器和试剂说明书设定测定条件,进行定标品、质控样品和样品分析。
【结果计算】
根据待测样本散射光,仪器根据α 2-MG定标品浓度(至少2个不同水平),自动计算出样本中α 2-MG浓度。
【参考区间】
成人血清α 2-MG (散射浊度法) : 1.3~3.0g/L (此参考区间引自试剂说明书)。
【注意事项】 1.方法学特点
本法人血清α 2-MG最低检测限为0.05g/L,线性范围为0.05~6.4g/L,批内CV≤4%、批间CV≤6%。轻中度黄疸和溶血血清标本对本法无显著干扰。但脂血血清对本法有明显干扰。
2.影响因素
有关散射浊度法的一些共同影响因素,参阅本章第二节血清白蛋白测定中免疫比浊法的注意事项。
3.参考区间应用
以其他定量免疫学方法,包括透射比浊法及散射免疫浊度法不同厂家试剂盒测定的结果均存在差异,应建立使用方法的本实验室参考区间。
【临床意义】 1.α2-MG水平升高
α 2-MG为非急性时相反应蛋白。低白蛋白血症,尤其是肾病综合征时,其含量可显著增高,出现α 2-MG/白蛋白比率显著增大,这可能是一种保持血浆胶体渗透压的代偿机制,也与α 2-MG分子量大,难以从肾小球滤过丢失有关;肝硬化与糖尿病患者α 2-MG浓度也会升高。
2.α2-MG水平降低
见于急性胰腺炎和进展型前列腺癌治疗前,并与病情的严重程度有关;也见于弥散性血管内凝血( DIC)、抗纤维蛋白溶解治疗、心脏手术、营养不良等疾病;低α 2-MG浓度的急性心肌梗死者预后较好。