全国临床检验操作规程(第4版)
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第九节 血清α1-微球蛋白测定

α 1-微球蛋白(α 1-microglobulin,α 1-MG)为肝细胞和淋巴细胞产生的一种分子量仅33kD的糖蛋白,电泳出现于α 1区带而得名。α 1-MG存在于体液及淋巴细胞膜表面,血浆中α 1-MG以游离或与IgG、白蛋白结合的两种形式存在。游离α 1-MG可自由滤过肾小球,但原尿中99%以上的α 1-MG被近曲小管上皮细胞以胞饮方式重摄取并分解(不以原型返回血浆),仅微量从尿排泄。血清α 1-MG可用各种定量免疫学方法测定,下面以应用较多的免疫比浊法为例介绍。

【原理】

抗人α 1-MG多或单克隆抗体与样本血清中α 1-MG通过抗原-抗体反应特异性结合,形成免疫复合物微粒,导致浊度增加。在一定条件下,浊度的增加与免疫复合物微粒数即α 1-MG数相关,得以定量样本中α 1-MG浓度。浊度检测包括散射浊度法和透射浊度法2类(参阅本章第二节血清白蛋白测定中的免疫比浊法)。因后一种方法在自动生化分析仪上即可完成,被广泛使用。

【试剂】

选用有正式批文的质量可靠产品。下面以α 1-MG透射浊度法某试剂盒为例。

1.试剂1

35mmol/L醋酸盐缓冲液( pH 5.3) 含40g/L聚乙二醇和防腐剂。

2.试剂2

35mmol/L醋酸盐缓冲液( pH 5.3)中含标定滴度的羊抗人α 1-MG抗体和防腐剂。

【操作】

不同实验室具体反应条件会因所用仪器和试剂而异,在保证方法可靠的前提下,应按仪器和试剂说明书设定测定条件,进行定标品、质控样品和样品分析。

【结果计算】

根据待测样本浊度,按系列浓度α 1-MG标准品绘制的曲线及拟合的方程式,自动计算出样本中α 1-MG浓度。

【参考区间】

成人血清α 1-MG浓度(透射浊度法) : 10~30mg/L (此参考区间引自试剂说明书)。

【注意事项】 1.方法学特点

本法人血清α 1-MG最低检测限为2mg/L,线性范围为2~750mg/L,批内CV<5%、批间CV<6%。轻中度黄疸和溶血血清标本对本法无显著干扰。但高甘油三酯血清对本法有负干扰。由于α 1-MG存在与人类白细胞抗原HLA-A11、HLA-B20 和HLA-BW51等有交叉反应的抗原决定簇,因此,必须选用特异性抗α 1-MG的抗体制备的试剂盒。否则将导致测定结果明显假性升高。

2.影响因素

有关透射浊度法的一些共同影响因素,参阅本章第二节血清白蛋白测定中免疫比浊法的注意事项。

3.参考区间应用

以其他定量免疫学方法,包括散射免疫浊度法及透射比浊法不同厂家试剂盒测定的结果均存在差异,应建立使用方法的本实验室参考区间。

【临床意义】 1.血清α1-MG升高

多见于各种原因所致肾小球滤过功能损伤,也见于IgA型骨髓瘤、肝癌等。在判断肾小球滤过功能损伤上,血清α 1-MG与胱抑素C的诊断性能相当。由于血清胱抑素C的广泛应用,加之α 1-MG的上述肾排泄特点,目前更常检测尿α 1-MG浓度作为诊断近端肾小管损伤标志(参阅本章第二十节尿α 1-微球蛋白测定)。

2.血清α1-MG降低

提示重度肝功能损害致其生成减少。