从复杂的生物体基因组中采用不同方法分离并获得带有目的基因DNA片段。获得目的基因主要通过以下方法：①鸟枪克隆法：包括提取细胞总DNA，经过酶切、克隆至特定载体，再转化至特定宿主细胞，构建成具有一定大小的目的基因。②人工合成目的基因：包括酶促方法、化学合成方法和聚合酶链式反应（PCR）。其中酶促方法经提取编码基因的信使RNA（mRNA），在逆转录酶的作用下，合成互补DNA链，在DNA聚合酶Ⅰ的作用下，加工成双链DNA分子；化学合成法前提必须是已知基因的核苷酸序列，化学合成的DNA片段一般较短，需要用DNA连接酶进行连接，从而获得较长的DNA片段；聚合酶链式反应必须是已知基因的核苷酸序列，根据序列设计引物，进行PCR扩增获得目的基因，也可以通过反转录PCR等方法，直接从富含目的基因的实验材料中提取RNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA，以此为模板进行PCR扩增获得目的基因。