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2.3 多糖脱色素技术
多糖粗提物常含有杂质和色素,因氧化作用而使多糖颜色变深,影响多糖质量和后续的研究,所以需要进行脱色处理。常用的脱色素方法有活性炭法、氧化法、树脂法等[21~23]。
2.3.1 活性炭脱色方法
活性炭属于吸附脱色。由于活性炭颗粒较小,也同样会吸附多糖,影响多糖的提取率。活性炭脱色可以反复进行,直到溶液颜色澄清,多糖保留率较高,适用范围广。一般以活性炭加入量、溶液pH值、脱色温度、脱色时间作为研究参数获得最佳脱色方法。如龙眼多糖的最佳脱色参数为:活性炭加入量为溶液体积的0.4%,pH值为4.0,温度为20℃,反应时间为40min[24]。荔枝多糖则需要加入活性炭量为1.4%,温度为60℃,pH值为4.0,反应30min[25]。
2.3.2 双氧水脱色方法
H2O2脱色法较为剧烈,属于氧化脱色法。H2O2用量和pH值是影响脱色效果的关键;温度是保证脱色后多糖保留率的关键,温度过高会引起多糖降解。此法脱色迅速、简便;脱色后与多糖易于分离。由于H2O2氧化性较强,使用时浓度不宜过高,且在温度较低的条件下进行,否则容易造成多糖的降解[26]。
2.3.3 吸附树脂脱色方法
离子交换树脂和吸附树脂已有用于多糖脱色的报道。毕元才采用AB-8和D-280大孔吸附树脂进行分离提纯冬虫夏草多糖的研究,研究结果表明,当用AB-8大孔吸附树脂处理浓度为2.0mg·mL-1的冬虫夏草原液200mL,上样液的pH值为6,多糖渗滤液的流速为0.8mL·min-1,得多糖246.4mg,再经D-280大孔吸附树脂进行脱色处理,最后得到冬虫夏草多糖207.1mg[27]。