三、检查热原的方法

（一）热原检查法

热原检查法即家兔致热试验法，是指将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。

由于家兔对热原的反应与人体相同，目前各国药典法定的热原检查法仍为家兔法，对家兔的要求、试验前的准备、检查法和结果判断均有明确规定。对家兔的试验关键是动物的状况、房屋条件和操作。家兔法检测内毒素的灵敏度约为0.001μg/ml，试验结果接近人体真实情况，但操作烦琐费时，不能用于注射剂生产过程中的质量监控，且不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。

（二）细菌内毒素检查法

细菌内毒素检查法是利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

细菌内毒素检查法原理是利用鲎的变形细胞溶解物与内毒素之间的胶凝反应。市场上有现成的鲎试剂，具体操作和鉴定结果的方法在《中国药典》中都有规定。鲎试验法特别适用于某些不能用家兔致热试验法进行热原检测的品种，如放射性制剂、肿瘤抑制剂等。因为这些制剂具有细胞毒性而具有一定的生物效应，不适宜用家兔法检测。

细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，光度测定法又包括浊度法和显色基质法，供试品检测时，可使用任何一种方法进行试验，当检验结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度试验结果为准。

细菌内毒素检查法灵敏度约为0.0001μg/ml，比家兔法灵敏10倍，操作简单，实验费用少，可迅速获得结果，适用于生产过程中的热原控制，但易出现“假阳性”，且对革兰阴性菌以外的细菌内毒素不够敏感，故不能完全代替家兔致热试验法。