实训11 大黄的鉴定

【实训目标】熟练掌握大黄的显微及理化鉴别特征；学会依据国家药品标准，综合鉴定大黄的真伪优劣；学会书写检验报告书。

【实训准备】

1．实训材料 本品为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L. 、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim. ex Balf．或药用大黄Rheum officinale Baill．的干燥根及根茎。大黄粉末、大黄永久制片、大黄检品（市售品）、大黄对照药材、大黄酸对照品等。

2．实训器具 显微镜、微量升华装置、紫外分析仪、分析天平、蒸发皿、回流提取装置、硅胶H薄层板、展开缸、紫外光灯、恒温干燥箱、滤纸等。

3．实训试剂 蒸馏水、稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液、氢氧化钠试液、甲醇、45%乙醇、盐酸、乙醚、三氯甲烷、石油醚（30～60℃）、甲酸乙酯、甲酸、氨试液、羧甲基纤维素钠等。

【实训内容及步骤】

1．性状鉴别 呈类圆柱形、圆锥形、卵圆形或不规则块状。长3～17cm，直径3～10cm。除尽外皮者，表面黄棕色至红棕色，有的可见类白色网状纹理，习称“锦纹”（系类白色薄壁组织与红棕色射线所形成），或有部分棕褐色栓皮残留，多具绳孔及粗皱纹。质坚实，有的中心稍松软。断面淡红棕色或黄棕色，显颗粒性；根茎髓部宽广，有“星点”（异常维管束）环列或散在；根形成层环明显，木部发达，具放射状纹理，无髓部及星点。气清香，味苦而微涩，嚼之粘牙，有沙粒感，唾液被染成黄色。

2．显微鉴别

（1）大黄根茎横切面：注意观察：①木栓层及皮层多已除去，偶有残留。②韧皮部筛管群明显，薄壁组织发达，有黏液腔。③形成层成环。④木质部射线较密，宽2～4列细胞，内含棕色物；导管非木化，常1至数个相聚，稀疏排列。⑤髓部宽广，有异常维管束（星点）环列或散在；异常维管束的形成层成环，外侧为木质部，内侧为韧皮部，射线呈星状射出；韧皮部中有黏液腔，内含红棕色物质。⑥薄壁细胞含草酸钙簇晶及淀粉粒。

（2）大黄根横切面：木质部发达，中央无髓。余同根茎。

（3）大黄粉末：黄棕色。注意观察：①草酸钙簇晶：直径20～160μm（～190μm），棱角较钝。②导管：为具缘纹孔、网纹、螺纹及环纹导管，非木化。③淀粉粒：甚多，单粒呈类球形或多角形，直径3～45μm，脐点星状；复粒由2～8分粒组成。

3．理化鉴别

（1）微量升华：取本品粉末，进行微量升华，可见菱状针晶或羽状结晶。

（2）薄层色谱：①供试品溶液的制备：取粉末0.1g，加甲醇20ml，浸泡1小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，回流加热30分钟，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，即得。②对照药材溶液的制备：取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。③对照品溶液的制备：取大黄酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，即得。④薄层色谱试验：吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。⑤结果判断：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同的5个橙黄色荧光主斑点；在与对照品色谱相应的位置上，应显相同的橙黄色荧光斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。

（3）检查：①总灰分：不得过10.0%。②干燥失重：取本品，在105℃干燥6小时，减失重量不得过15.0%。③土大黄苷：取粉末0.2g，加甲醇2ml，温浸10分钟，放冷，取上清液10μl，点于滤纸上，以45%乙醇展开，取出，晾干，放置10分钟，置紫外光灯（365nm）下检视，不得显持久的亮紫色荧光。

（4）浸出物：按水溶性浸出物测定法（热浸法）测定，不得少于25.0%。

【实训提示】

1．进行升华鉴别时，粉末用量以0.5g左右为宜，过少不易产生足够量的升华物，过多易使升华物积聚成片影响观察。加热升华时，升温不宜过快，温度不宜过高，以免药粉焦化，产生焦油状升华物，影响观察或检识。温度的控制可通过调整酒精灯火焰与石棉板的间距来实现。为使升华物易于凝集析出，可在载玻片上滴加少量水降温。

2．进行荧光检查时，一般用毛细管吸取供试液，少量多次点于滤纸上，使斑点集中且具有一定浓度。一般将供试品置于紫外光灯下约10cm处荧光，紫外光波长一般为365nm，如用254～265nm波长，应予注明。荧光强度较弱，故应在暗室中观察。紫外光对人的眼睛和皮肤有损伤，操作者应避免长时间与紫外光接触。

【实训报告与考核】

1．绘大黄根茎横切面简图及粉末特征图；记录理化鉴定结果。

2．将综合鉴定结果与药品标准相比较，判断供试品是否符合规定。

3．书写药品检验报告书。