四、蛋白质分析技术

当一个正常细胞转变成为一个肿瘤细胞时，蛋白质的表达会发生一些明显变化。蛋白质分析技术能够从细胞水平上显示出肿瘤变化过程中蛋白质的变化，对肿瘤的早期诊断、发生发展、治疗及预后的评估具有重要的意义。目前常用的蛋白质分析技术包括双向凝胶电泳技术及蛋白质芯片技术等。

1.双向凝胶电泳技术

双向凝胶电泳技术是目前蛋白组学的三大支撑技术之一。其原理是先根据蛋白质等电点不同，使蛋白质得到第一次分离，然后再根据蛋白质分子量大小不同，在特殊介质下再一次分离。随着双向凝胶电泳的不断发展，在此基础上又发展出一种新型的分析手段：荧光差异显示双向凝胶电泳。此技术是在双向电泳基础上加入荧光标记技术，从而得到不同样品结果，分析得到存在表达差异的蛋白质。

2.蛋白质芯片技术

蛋白质芯片（protein chip）是一种高通量的蛋白功能分析技术，该技术不仅是蛋白质组学研究中强有力的工具，也是疾病早期诊断、治疗效果评测的新手段。其原理是用未标记或标记的生物分子与芯片上的探针进行特异性结合，再通过特定的扫描装置进行检测、分析处理。具有特异性强、样本前处理简单、效率极高、使用方便等优点。但是蛋白质芯片的制备及反应过程比基因芯片更复杂，在众多环节中存在着技术问题，随着蛋白质芯片技术的日益完善，它必将为肿瘤疾病的生物学表达信息、药物筛选及药物靶点的选择提供更有利的技术支持。

尽管蛋白质分析技术多种多样，但是应用于胆囊癌的研究中却较少。目前，多种肿瘤如乳腺癌、肺癌、大肠癌等恶性肿瘤因蛋白质分析技术的发展而受益，如发现新的蛋白标志物，建立肿瘤蛋白差异图谱等。希望不久的将来，蛋白质分析技术会更多地应用于胆囊癌的研究（图5-2）。

图5-2　蛋白质芯片研究内容