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第四节 浆膜腔积液有形成分分析
【原理】
根据浆膜腔积液中的各种细胞形态特点，通过计算一定体积的浆膜腔液体内细胞数或将标本染色分类计数，计算出浆膜腔积液中各种细胞的数量或百分比。
【试剂与器材】
1.试管、吸管、玻棒、改良Neubauer计数板、盖玻片和显微镜。
2.冰醋酸、白细胞稀释液、瑞氏染液或瑞-吉染液。
【操作】 1.细胞总数及有核细胞计数
计数方法与脑脊液相同，如细胞数较多的应用稀释法进行检查。
2.细胞形态学检查及分类 ( 1)直接分类法:
高倍镜下根据有核细胞的核有无分叶分别计数单个核细胞和多核细胞，计数100个有核细胞，以比例或百分比表示。
( 2)染色分类法:
穿刺液应在抽出后立即离心，用沉淀物涂片3～5张，也可用细胞玻片离心沉淀收集细胞，以瑞氏或瑞-吉染色法进行分类。必要时，制备稍厚涂片，湿固定30分钟，作苏木素-伊红( HE)或巴氏染色查找癌细胞。恶性肿瘤性积液主要为腺癌，其次为鳞癌、间皮瘤等。漏出液中细胞较少，以淋巴细胞和间皮细胞为主;渗出液中细胞种类较多。
3.其他有形成分 ( 1)结晶:
胆固醇结晶见于脂肪变性的陈旧性胸腔积液、胆固醇性胸膜炎所致积液;积液中伴嗜酸性粒细胞增多时，可见有夏科-雷登结晶。
( 2)染色体:
染色体检查是诊断恶性肿瘤的有效检查方法之一，癌性积液细胞染色体变化主要有染色体数量异常、染色体形态异常的标志染色体。
( 3)病原微生物检查:
①细菌:对怀疑为渗出液的样本，应进行无菌操作离心沉淀后细菌培养和涂片染色检查。临床上可见的细菌有结核杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌等。②寄生虫及虫卵:积液离心沉淀后，涂片观察有无寄生虫及虫卵。乳糜性积液注意观察有无微丝蚴;包虫病所致的积液中可见到棘球蚴头节;阿米巴病的积液中可见阿米巴滋养体。
【临床意义】
1.通常漏出液＜100×10 6/L，渗出液＞500× 10 6/L。少量红细胞多见于穿刺损伤，对渗出液和漏出液的鉴别意义不大;大量红细胞提示为出血性渗出液，主要见于恶性肿瘤(最常见)、穿刺损伤及肺栓塞等。
2.中性粒细胞增多(＞50%)常见于急性炎症(如类肺炎性胸腔积液)。
3.淋巴细胞增多(＞50%)常见于漏出液、结核、肿瘤、冠状动脉分流术、淋巴增生性疾病和乳糜性积液。
4.嗜酸性粒细胞增多(＞10%)常见于气胸、肺栓塞、外伤性血胸、胸管反应、寄生虫病和Churg-Strauss综合征。
5.源自实体肿瘤的肿瘤细胞常见于转移性肿瘤。原始细胞常见于造血系统恶性肿瘤。
6.胆固醇结晶见于陈旧性胸腔积液和胆固醇胸膜炎积液;含铁血黄素颗粒见于浆膜腔出血。
7.乳糜性积液离心后沉淀物中可查有无微丝蚴;包虫性胸腔积液可查有无棘球蚴头节和小钩;阿米巴性积液可查有无阿米巴滋养体。
【注意事项】
标本采集后及时送检，收到标本后应立即检查，以免积液凝固或细胞破坏使结果不准确。计数前，标本必须混匀。因穿刺损伤血管，引起血性浆膜腔积液，白细胞计数结果必须校正，以剔除因出血而带来白细胞。涂片染色分类计数时，离心速度不能太快，否则细胞形态受影响，涂片固定时间不能太长，更不能高温固定，以免细胞皱缩。