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第四节 脑脊液有形成分分析
【操作】 1.红细胞计数 ( 1)澄清标本:
可混匀脑脊液后用滴管直接滴入血细胞计数池,静置1分钟,在高倍镜下,计数5个大方格内红细胞数,乘以2即为每微升红细胞数。如用升表示,则再乘以10 6。
( 2)浑浊或血性标本:
可用微量吸管吸取混匀的脑脊液20μl,加入含红细胞稀释液0.38ml的小试管内,混匀后滴入血细胞计数池内,静置2~3分钟,在高倍镜下,计数中央大方格内四角和正中5个中方格内红细胞数,乘以1000即为每升脑脊液的细胞总数。对压线细胞按“数上不数下、数左不数右”的原则。
2.白细胞计数 ( 1)非血性标本:
小试管内加入冰醋酸1~2滴,转动试管,使内壁沾有冰醋酸后倾去,然后滴加混匀脑脊液3~4滴,数分钟后,混匀充入计数池,按血液白细胞计数法计数。
( 2)混浊或血性标本:
将混匀脑脊液用1%冰醋酸溶液按血液白细胞计数法稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数,用下式公式进行校正。
脑脊液白细胞校正数=脑脊液白细胞计数值-出血增加的白细胞数
出血增加的白细胞数=外周血白细胞数×脑脊液红细胞数/外周血红细胞数
3.细胞分类 ( 1)直接分类法:
白细胞计数后,将低倍镜换为高倍镜,直接在高倍镜下根据细胞核形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞、单核细胞)和多个核细胞,应数100个白细胞,并以百分率表示。若白细胞少于100个,应直接写出单个核、多个核细胞的具体数字。
( 2)染色分类法:
如直接分类法不易区分细胞或临床需细胞分类结果时,可将脑脊液离心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清1滴,推片制成均匀薄膜,置室温或37℃温箱内待干,行瑞氏染色后用高倍镜或油镜分类。如见有不能分类的细胞,应请有经验技术人员复核,并另行描述报告,如脑膜白血病或肿瘤细胞。最好取0.5ml脑脊液用玻片离心沉淀仪制片后染色分类,可最大限度地获取全部细胞,并保持细胞完整性,脑脊液中找到癌细胞是临床确诊脑膜癌重要手段。
【参考区间】
红细胞计数: 0×10 6/L。
白细胞计数:成人( 0~8)×10 6/L;儿童( 0~ 15)×10 6/L;新生儿( 0~30)×10 6/L。
细胞分类:淋巴细胞:成人40%~80%,新生儿5%~35%;单核细胞:成人15%~45%,新生儿50%~90%;中性粒细胞:成人<6%,新生儿<8%。
【注意事项】
1.计数应在标本采集后1小时内完成。如放置过久,细胞会破坏、沉淀或纤维蛋白凝集,导致计数不准确。
2.细胞计数时,应注意新型隐球菌与白细胞区别。前者不溶于醋酸,加优质墨汁后可见不着色荚膜。
3.使用计数板后应立即清洗,以免细胞或其他成分黏附在计数板上,影响使用。
【临床意义】
1.中枢神经系统病变的脑脊液细胞数可增多,其增多程度及细胞种类与病变性质有关。
2.中枢神经系统病毒感染、结核性或真菌性脑膜炎时,细胞数可中度增加,常以淋巴细胞为主,早期伴有中性粒细胞及单核细胞。
3.细菌感染时,如化脓性脑膜炎者细胞数显著增加,早期以中性粒细胞为主。
4.脑寄生虫病时,可见较多嗜酸性粒细胞。
5.脑室或蛛网膜下腔出血时,脑脊液内可见多数红细胞,红细胞吞噬细胞及含铁血黄素细胞。
6.脑膜白血病和脑膜癌时,可见白血病细胞或癌细胞。