上消化道有少量出血时，红细胞被消化而分解破坏，由于显微镜下不能发现，故称为隐血。目前，粪便隐血试验( occult blood test，OBT)常用化学法或免疫法测定粪中血红蛋白，也可联合测定粪中转铁蛋白。其中，免疫法粪便隐血试验是一种高灵敏度的测定方法，有胶乳凝集法、EIA法、胶体金法和免疫层析法等。此外，还有半自动、全自动的粪便隐血试验仪器。

血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化H ₂O ₂作为电子受体使色原(如邻联甲苯胺)氧化而显色(如邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯显蓝色)。

1.10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液。

2.3%过氧化氢液。

1.用小木棍挑取少量粪便，涂在消毒棉签或白瓷板上。

2.滴加10g/L邻联甲苯胺( o-tolidine)冰醋酸溶液2～3滴于粪便上。

3.滴加3%过氧化氢液2～3滴。

4.立即观察结果，在2分钟内显蓝色为阳性。

加入试剂2分钟后仍不显色。

加入试剂10秒后，由浅蓝色渐变蓝色。

加入试剂后初显浅蓝褐色，逐渐呈明显蓝褐色。

加入试剂后立即呈现蓝褐色。

加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。

1.3%过氧化氢液易变质失效，须进行阳性对照试验，将过氧化氢滴在血片上，应产生大量泡沫。

2.齿龈出血、鼻出血、月经血等可导致阳性反应。

3.用具应加热处理(如试管、玻片、滴管等)，以破坏污染的过氧化物酶。

4.也可选用中等敏感( 0.3～1mg Hb/g粪便)的愈创木酯法，但必须选购质量优良的愈创木酯，配制成20g/L愈创木酯( gum guaiacum)乙醇溶液，代替10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液，操作同上。

采用抗人血红蛋白的单克隆抗体或多克隆抗体，与粪便样品中的人血红蛋白特异性结合以检测粪便中有无血液。本试验不受动物血红蛋白的干扰，试验前不须禁食肉类。

根据不同试剂盒的说明书操作。

样品中血红蛋白浓度达到10～14mg Hb/L或0.2mg Hb/g粪便，就可得到阳性结果。

免疫法对人血红蛋白特异性很强，样品中鸡、牛、马、猪、羊等动物血液血红蛋白含量在500mg/L以下时，不出现假阳性结果。

( 1)本法可以帮助医生早期发现胃肠道因病变的出血，然而，由于家族性息肉或直肠癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均匀，或粪便处理不当(高温、潮湿、放置过久等)都可造成阴性结果。

( 2)本法对正常人检验有时也会得到阳性结果，这是由于某种刺激胃肠道的药物造成粪便隐血所致。

( 3)本法只能作为筛查或辅助诊断用，不能替代胃镜、直肠镜、内镜和X线检查。

( 4)上消化道出血者本法阳性率低于化学法。

1.消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验可阳性。一般而言，上消化道出血时化学法比免疫法阳性率高;下消化道出血时免疫法比化学法灵敏度高。

2.消化道恶性肿瘤时，一般粪便隐血可持续阳性，溃疡病时呈间断性阳性。本法对消化道恶性肿瘤的早期检出率约30%～40%，进展期约为60%～ 70%，如果连续检查2天，阳性率可提高10%～15%。