淋巴管免疫组织化学染色同常规免疫组织化学染色方法一样，只是一抗需选择淋巴管较特异、敏感的标记分子。主要过程操作如下：冷冻切片、涂片或单层细胞培养物按要求进行固定，石蜡切片常规脱蜡、水化组织；然后3% H ₂O ₂室温孵育5～10分钟，阻断内源性过氧化物酶；抗原修复（热修复或酶消化修复）；按一抗要求，对组织进行预处理后，进行孵育，37℃ 30～60分钟或4℃过夜；按二抗试剂盒要求操作加入二抗；显色，复染、脱水、透明、封固。注意每一步骤之间用缓冲液冲洗和一抗的作用浓度。

为了证明抗体的特异性和实验操作的规范性，免疫组化实验必须有空白对照和阳性对照；此外，为了比较和区分淋巴管和血管，常采用连续切片分别标记淋巴管和血管，或者进行双染，也可进行免疫荧光染色。

淋巴管内皮细胞特异性标志物的发现和使用，使免疫组织化学显示淋巴管成为可能，并成为淋巴管研究的重要手段。近年来张雅芳等（2007～2011）在淋巴管的定性和定位研究中应用了上述淋巴管标记物VEGFR-3和Podoplanin标记了人结肠癌组织淋巴管，用LYVE-1标记了人恶性黑色素瘤、胰腺癌、乳腺癌、肺癌及移植瘤模型组织淋巴管，用D2-40标记了人卵巢癌、甲状腺癌、乳腺癌和肺癌等组织淋巴管（图3-24，25）。