第三章 药用植物学实验

实验一 显微镜的构造与使用及临时标本片的制作

【实验目的】

1．熟悉显微镜的构造与使用及其注意事项。

2．熟练地正确制作临时标本片。

【实验试剂】

纯化水，液体石蜡。

【实验材料】

桉叶，薄荷茎及叶。

【方法与步骤】

一、显微镜的构造

显微镜的样式较多，但它的基本构造是相同的，可分为机械装置与光学系统两部分。

（一）机械装置

1．镜座：是显微镜的基座，用来支持镜体，常呈马蹄形。

2．镜柱：是连接于镜座上的金属短柱，可支持镜臂与载物台。

3．镜臂：呈弓形，是用手握取的部分，与镜柱相连，既支持镜筒，又支持载物台。

4．载物台：位于显微镜的中部，用来安放标本片，中心有个通光孔，台上的标本片推动器能将固定后的标本片向前后、左右移动，便于镜检。

5．镜筒：是垂直的金属圆筒，与镜臂连接固定后，其上装有目镜，下连转换器。

6．转换器：可左右转动的球面金属器，其下装有不同倍数的物镜。

7．调节器：位于镜臂两侧，有粗、微两种，用以调节物镜和标本之间的距离，使物像清晰。一般低倍镜用粗调节器，高倍镜用微调节器。

（二）光学系统

1．目镜：安装在镜筒上端，其内可放目镜测微尺和指针。一般它的放大倍数为5×、10×、15×等。

2．物镜：安装在转换器下面，有物镜和油镜，低倍镜为5×或10×，高倍镜为40×或60×，油镜为90×。

3．聚光器：由几个透镜组成，用来集中光线，位于载物台的下方，有的是虹彩圈。

二、显微镜的使用

显微镜是一种精密的光学仪器，必须学会正确的操作方法，既有利于保护仪器，又能充分发挥显微镜的性能，得到良好的观察效果。

1．取、放显微镜时，必须用右手握住镜臂，左手托住镜座，小心轻放。

2．放置显微镜时，应注意将镜座放在距实验台边缘6cm左右的位置，稍偏实验者左侧，右侧放实验指导和实验本等。

3．使用时向内（逆时针方向）旋转粗调节器提升镜筒，然后旋转转换器，使低倍镜与镜筒成一直线。打开光源，通过目镜可以看到白亮的圆形视野。

4．移动标本片，将欲观察的部分对准中央孔，从右侧面观看物镜与玻片之间的距离，慢慢往外（顺时针方向）转动粗调节器，使物镜与玻片相距约5mm为止。切勿使镜头与玻片接触，以避免损坏镜头和压破玻片。

5．观察目镜，并慢慢向内（逆时针方向）旋转粗调节器，至视野内出现清晰的物像为止。如所观察部分不在视野中心，则慢慢移动载玻片，使之居于正中。

6．看到物像后，再转动微调节器，直到看到最清楚的物像为止。

7．高倍物镜的使用：

（1）在低倍镜找到物像后，将欲放大做仔细观察的部分移至视野中央。

（2）从右侧面注视，小心转动转换器，将高倍物镜对准玻片上欲观察的部分。

（3）调节微调节器至看到清楚的物像为止。此时切勿使用粗调节器，否则会损坏镜头和压破标本片。

（4）如果视野太暗或太亮，则应调节光栅，使光线强度适中。

8．实验完毕，取下玻片，清洁显微镜，使物镜离开中央孔，向外转动粗调节器使镜筒下降，一手握镜臂，一手托镜座，然后放入镜箱内。

三、显微镜的保护及使用注意事项

（1）显微镜应放在干燥的地方，使用时避免强烈日光照射。

（2）拿取及搬动显微镜时，应一手握镜臂，一手托镜座，使镜身直立，切勿倾斜摇摆，以免碰损或使目镜滑落。

（3）显微镜取出后，应先检查有无缺损。使用前用布擦干净，镜头有污秽时用擦镜纸擦拭，绝不能用手擦。

（4）使用时，镜身应放在面前实验台适中位置，以利于观察。

（5）做显微化学反应时，必须将制片由载物台上取下再滴加试剂，然后盖上盖玻片，并用吸水纸吸净盖玻片外的多余试剂，以避免腐蚀镜头和载物台。

（6）加热处理的制片，必须放冷后并加盖玻片才能观察。

（7）实验完毕后，必须将显微镜全部擦净。

四、常用临时标本片的制作

1．盖玻片、载玻片的清洁法：取一块绸布，盖于左手的拇指与食指之间，右手的拇指和食指持玻片1/3处拖擦，不得往返，直到将玻片对光视其表面无任何尘埃及指纹。再颠倒另一端用同样方法拖擦干净。

检查盖玻片、载玻片是否清洁，可在载玻片上滴1滴纯化水，水呈球形即可。否则应再水洗及拖擦。每次实验完后，所用过的盖玻片、载玻片必须水洗与拖擦干净，以备下次实验使用。

2．徒手切片：操作简便，节省时间，只需一刀片就可切成薄片，能看见材料的天然色泽。取一段长1cm～2cm的薄荷茎，以左手的拇指和食指夹住材料，中指顶住材料的底部，左臂贴身，左手固定不动，将材料上端露出食指2mm～3mm，不宜过长。用右手的拇指与食指挟持刀片的两侧，使刀片成水平方向（与材料横切面平行），移动右臂，使刀口向内自左向右拉削，切勿来回拉切。切时可先将材料切面或刀刃润湿，切下的薄片用毛笔刷下并放入有纯化水的玻璃器皿中备用。刀片用后立即擦干水分并涂上液体石蜡，备用。

用手指难以夹住的薄的或细小的材料，如叶片、幼根及种子等，可取一段通草，在中间纵切一缝，然后夹入材料，切法同前。

观察叶的表面观、气孔类型等时，可将要观察的叶放在左手的食指上，拇指和中指压住叶片两端，右手持镊子，用内侧的尖刺破叶片，然后夹住材料慢慢地向外撕取（用力要均匀）。撕下一层薄膜，立即放到有纯化水的载玻片上。若有卷叠，必须用解剖针弄平。再用镊子夹住盖玻片覆盖，用滤纸屑吸去余液，才可置于显微镜下观察。

3．装片：在洁净的载玻片上滴一滴纯化水，选已切好的薄荷茎薄片，用镊子放入试液中；检查无折叠现象，方可用镊子夹住盖玻片的一端，另一端接触试液逐渐盖上；用滤纸屑吸去余液后，置于显微镜下观察。盖片时，注意不要产生气泡。

【实验报告】

完成实验报告。

（李涛）