2.5 多糖的含量测定方法
多糖提取纯化后，需对多糖的含量即多糖的纯度进行测试，这是多糖质量控制最基本的问题，也是多糖在结构鉴定之前必须阐明的问题。因多糖的结构中无发色团，故无紫外吸收，也不能发出荧光，因此，不能直接通过紫外分光光度法和荧光分光光度法测定多糖含量。多糖的含量测定方法一般采用多糖在浓酸作用下水解为单糖，单糖在浓酸下发生缩合反应形成糠醛或糠醛衍生物，进行显色后采用比色法进行测定。常用的方法有苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法和地衣酚-盐酸法。
2.5.1 苯酚-硫酸法
多糖在浓H2SO4作用下迅速水解，脱水生成糠醛或糠醛衍生物，然后与苯酚缩合生成1 种棕红色络合物，在特定环境下络合物的颜色（吸光度）与多糖中总糖的含量成线性关系，由此来测定多糖中总糖的含量。该法所采用的试剂价格低廉，灵敏度高，蛋白质等杂质不干扰测定，故被广泛采用［51，52］。该法的特点是六碳糖在显色后最大吸收波长一般在490nm 处，五碳糖和糖醛酸显色后最大吸收波长一般在480nm处。
另外，苯酚在空气中易氧化生成醌类物质，导致吸收波长发生偏离或吸收值不稳定，所以苯酚在使用前一般宜进行重蒸馏，且需要现配现用。不同多糖在使用该法时，苯酚用量、硫酸用量、反应温度和反应时间等反应条件应进行优化。
2.5.2 蒽酮-硫酸法
蒽酮-硫酸法与苯酚-硫酸法的共性是多糖在浓H2SO4作用下，迅速生成糠醛或糠醛衍生物，不同点是糠醛或糠醛衍生物与蒽酮缩合生成一种蓝绿色络合物，在特定条件下络合物的颜色（吸光度）与多糖中总糖的含量成线性关系，由此来测定多糖中总糖的含量。
该法值得注意的是一些蛋白质类物质会干扰总糖含量的测定，所以在测定前一般需要进行脱蛋白质处理。该法的特点是糖与蒽酮形成的有色物质最大吸收波长一般在625nm 处。另外，蒽酮-硫酸溶液需要现配现用。该法操作比苯酚-硫酸法更为简便［53，54］。
2.5.3 地衣酚-盐酸法
多糖在盐酸作用下水解脱水生成糠醛或糠醛衍生物，然后与地衣酚结合生成有色络合物，最大吸收波长一般在660nm 处，其络合物的颜色（吸光度）与多糖中总糖的含量成线性关系，由此来测定多糖中总糖的含量［55］。这种方法一般用于戊聚糖含量的测定。相对前面两种方法，这种方法使用较少。