气相色谱分析技术
色谱柱对分析结果影响的比较
高利娜，徐恩宇，袁慧雅，刘俊亭
（中国医科大学法医学院，辽宁，110013）
1 实验部分
1.1 仪器条件
岛津GC/MS-QP2010。质谱条件：离子源温度：200℃；接口温度：270℃。正离子电离轰击源（70eV），不分流进样。两根短柱，具体情况见表1。
表1 两根短柱信息
柱1、柱2的差别就是分离柱的不同。本实验室原有的两根毛细管柱，见表2。
表2 两根长柱信息
1.2 提取方法
样品前处理步骤如下：取0.5ml或0.5g的生物样品（血/肝/胃容物），加入内标SKF-525A 500ng，加入0.1mol/L盐酸2ml，再加入碳酸铵0.5g，振荡2min，加入有机溶剂乙酸乙酯2ml振荡，然后以3000r/min的离心速度离心10min。完毕后，提取有机溶剂，氮气吹至少量，进样GC-MS分析。
2 结果与讨论
首先，对质谱条件进行调谐，选择合适的分析分离条件。色谱条件：初始柱温60℃，保持0.5min，以70℃/min的升温速率升至130℃，再以40℃/min的升温速率升至290℃，保持6min。载气压力是92.5kPa，载气流速是1.01ml/min，溶剂延迟时间0.9min，质谱开始扫描时间1.0min。质谱扫描范围是40～600u。
采用柱1和柱3对同一生物样品的分析结果见图1。由图可以看出：短柱缩短了分析时间，实现了快速、及时分析。
图1 比较柱1和柱3的分析分离情况
同一样品采用柱1、柱2、柱4得出的色谱图见图2。由图得出：待测物质在柱2的保留时间比在柱1的保留时间延后，这主要是因为柱2的分析柱柱长变长所致；待测物质在柱4的保留时间比在柱1、柱2的保留时间延后，由此可见短柱相比长柱更可以实现样品的快速分析。
图2 三根不同的色谱柱所得分析结果
3 结论
从色谱分析法的理论上可知塔板理论高度与柱内径、柱长度和固定液厚度都有关系。内径越细，柱效越高[1]。故目前多采用细内径、短毛细管柱进行快速分析。而液膜厚度增加会使柱效降低，但是如果两根毛细管柱相连，预处理柱液膜厚度较大可以去除较大酯类化合物或腐败物质，这点对于法医生物检材特别是腐败检材的分析特别重要。两根短柱相连接，可以实现及时、快速分析，但是相比长柱而言，柱效降低。
参考文献
[1] 李发美, 等. 分析化学[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2003.