第二节 真 菌
答：真菌属真核细胞微生物，除具有真核细胞的特征外，还有特征性真菌结构-营养体和繁殖体。依营养体形态类型分为单细胞真菌（酵母菌）和多细胞真菌。单细胞真菌大约是球菌的5～6倍，呈圆形或卵圆形的细胞，以出芽方式繁殖，多细胞真菌由菌丝和孢子交织组成，菌丝长短不一，直径一般在2～30μm不等。一般光学显微镜的低倍镜、高倍镜和油镜的放大倍数分别是×100、×400和×1000。人肉眼的最小分辨率为0.2mm，因此，根据真菌细胞大小、显微镜放大倍数和肉眼分辨能力，一般的光学显微镜在低倍或高倍物镜下即可观察到真菌的基本结构。
答：多细胞真菌由菌丝和孢子交织组成，称为丝状真菌（filamentous fungus）或霉菌（mold）。菌丝是由成熟的孢子在基质上萌发产出的芽管，进一步伸长，并产生分枝而不断生长，或是由一段菌丝细胞增长形成。每根单一的细丝称为菌丝（hypha），许多菌丝连接在一起所组成的整个营养体称为菌丝体（mycelium）。各种真菌菌丝形态各异，有网状菌丝、球拍状菌丝、梳状菌丝、螺旋状菌丝、鹿角状菌丝等。菌丝的差别表现在菌丝颜色（无色透明或有色、暗色），直径大小，有隔或无隔，横隔的构造状况和表面有无疣状物等几个方面。另外，不同的丝状真菌都有其特有的孢子，其形状大小、表面纹饰和色泽等各不相同。因此，通过光学显微镜观察菌丝和孢子的形态特征可以鉴别丝状真菌的菌种。
答：体癣、股癣主要由浅表性真菌例如红色毛癣菌、须癣毛癣菌、许兰毛癣菌、铁锈色小孢子菌、犬小孢子菌等所引起。当浅表性真菌侵犯人体表面的角质层后，可引起很轻的炎症反应，股癣初起的损害为针头到小米粒大小的丘疹或水疱，色鲜红或暗红，随后向周围扩展，中心愈合，呈环形或多环形，边缘清楚、上覆以鳞屑或痂皮。这一临床表现形式和该类真菌的生长方式相关，浅表性真菌往往从定植的皮肤表面或人工培养基的中心向四周同步生长形成圆形集落，中间为陈旧型集落，边缘为新鲜集落，故临床体癣、股癣等皮肤损害表现为圆形或多环形，感染的炎症反应边缘也比中心严重。
答：真菌菌落（fungal colony）一般是指在一定基质上，接种某种真菌的一个孢子或一段菌丝，经过培养，向四周蔓延生长的丝状群体，由菌丝和孢子组成。菌丝是真菌的营养器官，能吸收水分和养料。有的菌丝向上生长，称为气生菌丝（aerialmycelium）； 有的伸入培养基中称为营养菌丝（vegetative mycelium）；能产生孢子的称为生殖菌丝（germ mycelium）。气生菌丝构成表面菌丝体质地。底部菌丝体埋伏于培养基中或紧贴培养基表面向四周蔓延。由底部菌丝体直接生出分生孢子梗，菌落外观呈短茸毛状。由底部菌丝体生出气生菌丝，再由它生出分生孢子梗，往往有缠绕的气生菌丝团，一般菌落较厚，呈絮状。也有部分气生菌丝扭结成绳索、还有分生孢子梗自底部菌丝成束地生长，在菌落的外观上成粒状或粉状。有些真菌产生子实体或菌核，则菌落表面呈颗粒结构。有的菌落出现同心环或辐射状沟纹。有些真菌只在菌落中间区域生出分生孢子，边缘菌丝则不生育。菌落的大小也大有不同，有些种的菌落可蔓延扩展到整个培养基，而另一些种的菌落则局限生长。
答：依营养体形态真菌分为单细胞和多细胞真菌两类。另有一类称为双相型真菌（dimorphic fungus），其在含有动物蛋白的培养基上37℃培养时为酵母菌型，其营养体可以酵母或小球体形式生长；在25℃普通培养基上呈丝状菌，其营养体由菌丝和孢子交织组成。常见致病双相真菌包括皮炎芽生菌、荚膜组织胞浆菌、巴西副球孢子菌、粗球孢子菌、申克孢子丝菌、马尔尼菲篮状菌等。
答：真菌生长需要碳源、氮源和其他营养成分。体外培养时碳源由培养基提供，几乎所有的真菌都能利用葡萄糖作为碳源。氮源主要由硝酸盐、亚硝酸盐、氨、尿素、氨基酸和其他化合物。通常情况培养基中氮源由真菌转化为氨基酸后才被利用。其他成分如纤维素、氨基酸、无机盐等在培养基中蛋白胨中都已含有。琼脂为真菌体外培养多采用的固化支持物，另外真菌生长的最适pH为4.0～6.0。一般真菌专用的培养基是沙氏葡萄糖琼脂培养基（Sabouraud′s dextrose agar，SDA）。细菌培养基pH一般在7.2～7.4，除基本的碳源、氮源还有其他营养丰富的物质。常用的真菌培养基的营养物质往往只提供真菌生长需要最低营养成分，以利于限制细菌生长而促进真菌生长繁殖，提高真菌分离率。
答：真菌的组织病理学检查是指取怀疑有真菌感染的组织进行活检，即切取病损组织，经固定、包埋、切片与染色（HE染色、PAS染色或吖叮橙染色等）后，显微镜检查真菌结构判定是否发生真菌感染。组织病理学检查对于确定致病菌在组织内寄生并了解宿主的反应十分重要，而且一旦在组织切片中发现真菌菌丝和（或）孢子，即为诊断的有力证据。其结果与直接镜检和培养相结合对诊断的意义更大。除常用的真菌病原体染色方法外，免疫组化特异抗体染色可对临床常见条件致病菌做出特异性诊断，其应用于深部真菌感染的组织病理学检测具有高敏感、低背景、快速简便的特点，在真菌病的临床病理诊断中具有很好的应用价值。
（宋珍）