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二、病理
1.取材方式
推荐行淋巴结或肿物的完整切除或部分切取活检,或内镜下活检(鼻咽镜、支气管镜、胃镜、肠镜、胸腔镜、腹腔镜、纵隔镜等,尤其对呼吸道及消化道可疑病灶建议多位点、深取活检);切除或部分切取活检有困难时可考虑B超或CT引导下淋巴结或肿物的空芯针穿刺活检。不推荐细针穿刺或者针吸活检。
2.组织处理
切除的标本(通常为淋巴结)需及时切开固定(尽可能在标本离体30min以内,通常垂直于淋巴结长径间隔0.3~0.5cm切片,分别用于常规固定、流式细胞分析以及冻存生物样本库等),固定液选择4%中性甲醛溶液,固定时间为12~24h。
3.病理诊断
病理诊断技术包括形态学、免疫组化、遗传学及分子生物学等,但是需要特别指出的是,淋巴瘤的病理诊断十分困难,因此需要结合患者的临床表现、体格检查、实验室检查、影像学检查等结果进行综合判断。
(1)形态学:
非常重要,不同类型的淋巴瘤具有特征性、诊断性的形态学特点。
(2)免疫组化:
可用于鉴别淋巴瘤细胞的免疫表型,包括细胞系(例如:B或T/NK细胞)、肿瘤细胞的分化及成熟程度、某些遗传学异常(例如CCND1、ALK等基因易位所导致的蛋白异常表达)以及良、恶性疾病鉴别等。通过组合相关的免疫组化标记物,进行不同病种的鉴别诊断。
(3)流式细胞学检查及细胞遗传学检查:
可作为淋巴瘤病理诊断的辅助和补充诊断方法,有时对确诊至关重要。
可应用于淋巴瘤石蜡包埋组织免疫染色的常用标志物包括以下几个大类:①白细胞共同抗原(CD45/LCA);②B细胞相关标记物,例如CD20、CD79a、CD19、PAX5、Oct-2、Bob.1、κ、λ、IgG、IgG4、IgM、IgA、IgD、CD38、CD138、 CD23等;③T细胞/NK细胞相关标记物,例如CD3、CD2、CD5、CD7、CD4、CD8、CD43、CD45RO、CD56、CD57、细胞毒性分子(包括TIA-1、颗粒酶B、穿孔素)、T细胞受体蛋白(例如βF1、TCRG)等;④淋巴细胞活化/分化相关标记物,例如CD30、TdT、CD99、CD10、BCL6、MUM1等;⑤肿瘤基因和增殖相关标记物,例如ALK1、BCL2、BCL10、cyclin D1、C-MYC、P53、Ki-67等;⑥组织细胞、树突状细胞及髓系相关标记物,例如CD68(KP1、PGM1)、CD163、溶菌酶、髓过氧化物酶(MPO)、CD15、CD123、CD117、CD21、CD35、S-100、CD1a、CD207/langerin等;⑦微生物标志物,例如EB病毒(EBV)-LMP1、人类疱疹病毒8型(HHV8)等;⑧其他,例如EMA、细胞角蛋白、CXCL13等。
4.病理分类
淋巴瘤分为霍奇金淋巴瘤(HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)两大类,具体类型参见世界卫生组织(WHO)编订的《造血与淋巴组织肿瘤分类》(2016版) [6],见附录D。