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二、多种细胞因子的研究
(一)细胞因子在诊断LTBI中的价值
为了解决在TST和IGRA结果不一致情况下判定是否LTBI,Sauzullo等 [32]对196名卫生工作者在检测TST和IGRA结果不一致且除外BCG接种者后,延长特异性抗原刺激时间至72小时,检测IFN-γ与IL-2水平。结果发现,结果不一致的病例中13%在上述延长实验中IL-2产生了阳性反应。因此,长期的IL-2反应有潜在诊断LTBI的价值,尤其是病例在接受TST与IGRA检查后诊断仍不能确定时。Buchwald等 [33]评估了暴露于结核分枝杆菌的接触者基线和6个月后的TST状态,分为TST阳性、TST阳转、TST阴性三种。用ESAT-6/CFP-10刺激后1天和 6天后,12 种细胞因子(包括IFN-γ、IL-2、IP-10、TNF-α、IL-13、IL-17、IL-10、GMCSF、MIP-1b、MCP-3、IL-2RA和IL-1A)在TST阳性与TST阳转受试者中没有差异。IP-10和IL-17在基线时IGRA为阳性的TST阳转受试者中水平最高,提示,此两项指标可能提示为新近感染的生物标志物,提供了结核接触者的免疫动力学反应,有利于鉴别出结核高危人群。Jacobo等 [34]发现持续IGRA阳性的结核接触者中,体外抗原特异性Th1与 Th17的水平增加,并且血CD4 +CTLA-4 +和CD4 +Foxp3 +细胞的比例明显增高,说明IGRA阳性的个体可呈现出不同的免疫表型。鉴于使用TNF-α拮抗剂的患者LTBI的诊断即使采用IGRA也不能完全确诊,Sauzullo等 [35]率先研究此类患者血中多功能CD4 +T淋巴细胞(产生IFN-γ、IL-2和(或)TNF-α)的变化情况,发现LTBI受试者血中IFN-γ+ IL-2+双阳或三阳CD4 +T细胞的比例更高,而非LTBI受试者显示IFN-γ或IL-2单阳,或者IL-2与TNF-α双阳。该发现有助于诊断或排除LTBI,尤其是在最初IGRA阴性但治疗过程中IFN-γ水平波动的受试者。
(二)细胞因子在结核病诊断与鉴别诊断中的价值
Silva等 [36]探讨了结核病病人、结核感染者、健康人血CD8 +细胞的不同表型,结果发现在CD8 +细胞中IL-10与TGF-β的存在以及颗粒酶B表达的下调与活动性结核病人的细菌载量有关,提供了关于CD8 +细胞在结核病中扮演角色的新视角。Hur等 [37]试图寻找有用的生物标志物鉴别结核感染者、结核患者、非结核分枝杆菌病患者,结果发现抗原特异性IFN-γ、IL-2与CXCL10在结核病人及感染者中较健康人明显增高,只有血管内皮生长因子(VEGF)水平在结核病人与感染者中有差异。而活动性结核与NTM病人可通过血清 IL-2、IL-9、IL-13、IL-17、TNF-α和sCD40L 水平分辨开来。增加的sCD40L和降低的抗原特异性IFN-γ水平与治疗2个月后痰菌的阴转有关。Hur等 [38]为鉴别诊断儿童结核病与环境非结核分枝杆菌感染,评估了结核分枝杆菌ESAT-6免疫反应与堪萨斯分枝杆菌、鸟胞内分枝杆菌的ESAT-6类似物交叉反应。针对接种BCG 3年后的儿童细胞培养液的特异性细胞因子/化学素进行检测,并检测IFN-γ结果共5年。超过45%对ESAT-6有反应的受试者对非结核分枝杆菌的ESAT-6类似物也有反应。以ESAT-6-CFP-10刺激后对 IL-5、IL-9、IL-13及 IL-17的检测有利于将两病区分开来,尤其在两病流行广泛的地区该类鉴别方法很必要。