第二章　中药分子鉴定常用技术

第一节　引言

分子鉴定技术成为一项常规手段，是近代分子生物学的重要发现。1984年，美国学者Mullis发明了一项划时代的新技术“聚合酶链反应”（polymerase chain reaction，PCR）。在PCR反应中，DNA模板通过不断重复变性、复性、延伸3个程序，能够在2小时内将靶DNA扩增数百万倍。自此，以PCR为基础的各项技术，不再受样本模板量不足所限制，各国科学研究小组在此基础上相继发明了多种可靠实用的分子新技术。其中，我们小组于1994年率先发表利用基于AP-PCR方法的DNA指纹图谱技术成功鉴定商品人参和西洋参的基原（Cheung等，1994）。随着PCR技术成为国内外分析DNA的主要手段，2010年版《中国药典》首次记载蛇类药材（乌梢蛇和蕲蛇）的分子鉴别，将DNA技术的工作流程和实验条件纳入为一种国家法定标准。可以预见，分子鉴别中药材将有广阔的应用前景。

本章首先就分子鉴定技术的前处理关键技术“DNA提取”作简单介绍，其次着重介绍常用的分子技术，并就它们各自的优缺点、应用范围限制进行比较分析。