2.2 器具灭菌

2.2.1 金属器具灭菌

镊子、剪刀、解剖刀、接种针（环）直接用酒精灯火焰灼烧，然后放在用70%～75%（V/V）酒精擦拭过的金属架上；也可以用铝箔（注意事先检查，不用有小孔的铝箔）包裹放入烤箱于160℃高温干燥灭菌（干热灭菌）4h，易燃品如纸、棉花等不可干热灭菌。金属器具也可以用纸包好在高压灭菌锅中用蒸汽灭菌（湿热灭菌）1h，取出后如有必要可放入60℃恒温箱中烘干。

2.2.2 玻璃器皿洗涤和灭菌

先用洗涤剂或洗液将玻璃器皿洗净，至器皿的内、外壁（特别是内壁）不挂水珠后，用纸包好，放入高压灭菌锅中灭菌，在15lb/in2（或1.1kg/cm2,103kPa）,120℃下约1h。已经被污染的玻璃器皿，为防止孢子传播污染环境，必须先经高压灭菌，杀死微生物的孢子，然后再清洗，使用前再次高压蒸汽灭菌。

思考与讨论题

1．植物组织培养室需要具备哪些功能？

2．你所见过的超净工作台有哪几种送风方式？无菌操作时应注意些什么？

3．为什么超净工作台在使用前要检测污染率？

4．培养架上的荧光灯管为什么要根据它们发射光的波长（偏蓝和偏红）进行搭配？

5．培养室的温度该如何控制？培养小麦、甘蓝和水稻所需的最适温度有无不同？

6．什么是干热灭菌？什么是湿热灭菌？二者有何区别？

参考文献

[1] White P R. The cultivation of animal and plant cells. New York: The Ronald Press, 1954

[2] Dodds J H, Roberts L W. Experiments in plant tissue culture. Cambridge: Cambridge University Press, 1982:10—20.

[3] Reinert J, Yeoman M M．植物细胞和组织培养实验手册．尤瑞麟，王模善，译．北京：北京大学出版社，1988.