3 讨论

许多疾病的发生机制均与细胞凋亡的失控有关。细胞凋亡功能亢进将导致组织损伤和器官功能衰竭，如神经变性性疾病（帕金森病、老年性痴呆等）及缺血性心肌损伤等；而细胞凋亡功能的抑制将导致肿瘤的发生及免疫功能的异常。同时，凋亡也参与一些毒物的毒作用机制，Fox等和李国君等相继报道急性铅中毒可引起大鼠皮质颗粒细胞和神经细胞的凋亡，从而推测，神经细胞的凋亡可能是铅影响学习记忆功能的神经毒性分子机制的重要原因之一。Suarez-Fernandez等和Savory等认为，铝中毒诱导细胞凋亡发可能与铝的神经毒性有关。砷中毒诱导细胞凋亡也是砷的毒性作用机制之一。

本研究选择bcl-2家族作为研究对象，进一步探讨TETS中毒与bcl-2、bax基因表达的关系，从而为TETS神经毒性机制提供新的线索。研究发现，不同剂量TETS可使大鼠皮质、脑干等部位神经细胞与正常脑组织细胞相比，均表现出bcl-2 mRNA表达下降、bax mRNA基因表达增高，bcl-2/bax mRNA比值表达下降，并呈现显著性差异（P<0.05）；其中，以1.0LD50剂量组表达下降差异最大；比较同一剂量脑皮质与脑干部位的bcl-2/bax mRNA比值表达差异，发现脑干部位的bcl-2/bax mRNA比值与皮质间有明显差异，此结论与电镜结果一致，即TETS中毒大鼠脑干部位可见细胞明显损伤和坏死，皮质部位仅见水肿，病变明显较皮质重。

对同一部位不同中毒剂量bcl-2/bax mRNA比值研究还发现，不同剂量组bcl-2/bax mRNA比值并不呈现出典型的剂量-效应关系，但其变化也有一定的规律，脑干、皮质部位的bcl-2/bax mRNA比值差异高峰均在1.0 LD50剂量组，与正常对照组比较有显著性差异（P<0.01）, 2.0 LD50、1/2 LD50、1/10LD50剂量组与正常对照组比较有明显异常，表明bcl-2、bax基因表达与中毒剂量、存活时间有一定关系。

对TETS中毒后采用HE及电镜技术对相应脑组织进行观察，未见明显的凋亡细胞的发生，可能与电镜取材数量偏小有关，也可能因为从时间上bcl-2、bax基因表达的改变早于细胞凋亡。因此，分析TETS可能通过降低bcl-2基因表达，促进bax基因表达，使bcl-2/bax比值降低，导致细胞损伤，致细胞凋亡和存活信息平衡失调，从而最终诱导脑神经细胞的凋亡。所以，可以推测bcl-2、bax基因表达在TETS中毒起着十分重要的作用。有关TETS诱导脑神经细胞凋亡的确切机制有待进一步研究。

本研究中，常用峰高和峰面积作为PCR产物的量化指标，通过对两种指标结果的比较性研究，发现两指标显示结果一致，但由于两指标在代表扩增产物全面性等含义上，建议常用峰面积指标为好。